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難分離化合物新思路：Flash過柱純化中使用兩種不同溶劑體系進(jìn)行純化分離的案例分享
在有機(jī)合成以及藥物化學(xué)領(lǐng)域，F(xiàn)lash系統(tǒng)，又名快速純化系統(tǒng)，由于其高效快速的特點(diǎn)，而得Flash之名，在近幾十年的有機(jī)合成以及藥物化學(xué)的發(fā)展當(dāng)中，加快研發(fā)速度，提高實(shí)驗智能自動化水平，一直是科學(xué)家渴望改進(jìn)和突破的方向，在此背景之下，F(xiàn)lash技術(shù)得到了迅猛發(fā)展，快速純化系統(tǒng)經(jīng)過一代又一代的迭代更新，目前已經(jīng)在實(shí)驗室研發(fā)當(dāng)中扮演著不可或缺的角色；成千上萬的Flash系統(tǒng)進(jìn)入到了全球的有機(jī)合成以及藥物化學(xué)領(lǐng)域的各個實(shí)驗室，蓄力科研，加快研發(fā)。
Biotage致力于通過為制藥，分析和過程開發(fā)提供完整的解決方案來加速藥物研發(fā)和發(fā)展的過程，并在特定的細(xì)分應(yīng)用領(lǐng)域確立自己的領(lǐng)導(dǎo)地位；作為全球的Flash系統(tǒng)領(lǐng)導(dǎo)品牌，Biotage擁有三十多年Flash制造和應(yīng)用經(jīng)驗。
在實(shí)際Flash應(yīng)用過程當(dāng)中，我們也會遇到一些樣品分離度很低，分離效果不好的情況，往往我們可以通過改變梯度方法，更換柱效更高的色譜柱的方法來實(shí)現(xiàn)樣品的分離，此外我們還可以通過改變流動相的類型使得樣品得到分離，由于Biotage Isolera 系統(tǒng)可以支持單次梯度方法中使用多種流動相體系，此次我們將與您分享在同一個梯度條件下使用兩種不同溶劑體系從而達(dá)到樣品分離的案例。
此樣品有兩個產(chǎn)物點(diǎn)，在PE：EA = 10：1的條件下，TLC點(diǎn)板信息如下圖：
在紫外燈下，上下兩個點(diǎn)有交叉，離得很近。在嘗試了多種不同比例的流動相之后，發(fā)現(xiàn)樣品仍舊有交叉，之后我們將流動相進(jìn)行了修改，將流動相進(jìn)行了修改，用二氯甲烷-石油醚的體系代替現(xiàn)有的乙酸乙酯-石油醚。
在PE：DCM = 10：1的條件下，TLC點(diǎn)板信息如下圖：
可以發(fā)現(xiàn)，在DCM/PE的體系下，兩個產(chǎn)物點(diǎn)分的很開，而下點(diǎn)的保留非常強(qiáng)，幾乎沒有產(chǎn)生任何的位置移動，于是我們打算在通過DCM/PE的體系將第一個樣品洗脫下來后，更換流動相系統(tǒng)，使用EA/PE體系再將第二個產(chǎn)物點(diǎn)洗脫下來，由于Isolera系統(tǒng)支持在同一個梯度方法中使用多種溶劑體系，使得我們的設(shè)想的實(shí)現(xiàn)更加簡單方便。
所使用系統(tǒng)型號為：Isolera One，如下圖：
初始樣品量大約4g左右，所使用的色譜柱為45g Rening柱：
在梯度方法設(shè)定中，我們設(shè)定了兩種溶劑體系，如下圖：
方法設(shè)定之后，我們進(jìn)行了純化操作，如我們設(shè)想的一樣，第一個產(chǎn)物順利在第一段的DCM/PE體系下洗脫出來，第二個產(chǎn)物在第二段的EA/PE體系下洗脫出來，所得實(shí)驗結(jié)果報告如下：
從譜圖可以發(fā)現(xiàn)，本身分離度很低的產(chǎn)物通過流動相的改變，得到了完全的分離；如您遇到類似產(chǎn)物點(diǎn)交叉的情況，不妨也通過改變流動相進(jìn)行分離嘗試。
在Biotage Isolera 系統(tǒng)的幫助下，4g粗產(chǎn)物的分離只需要不到半個小時，大大加快了實(shí)驗速度，Biotage為您的實(shí)驗效率保駕護(hù)航！
