紫外可見分光光度法與熒光光度法的區別
一、指代不同
1、可見分光光度法:通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該物質進行定性和定量分析的方法。
2、熒光光度法:根據物質的熒光譜線位置及其強度進行物質鑒定和含量測定的方法。
二、特性不同
1、可見分光光度法:具有靈敏度高、操作簡便、快速等優點,是生物化學實驗中最常用的實驗方法。許多物質的測定都采用分光光度法。在分光光度計中,將不同波長的光連續地照射到一定濃度的樣品溶液時,便可得到與不同波長相對應的吸收強度。
2、熒光光度法:由于不同的物質其組成與結構不同,所吸收的紫外-可見光波長和發射光的波長也不同,同一種物質應具有相同的激發光譜和熒光光譜,將未知物的激發光譜和熒光光譜圖的形狀、位置與標準物質的光譜圖進行比較,即可對其進行定性分析。
三、作用不同
1、可見分光光度法:在定量分析時,首先需要測定溶液對不同波長光的吸收情況(吸收光譜),從中確定最大吸收波長 ,然后以此波長 的光為光源(單色光),進行吸光度A的測定,是朗伯比爾定律用于定量分析的首要條件。
2、熒光光度法:測量物質的熒光強度可對其進行定量測定。熒光分析法的特點是靈敏度高、選擇性好、樣品用量少和操作簡便。
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