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紫外可見分光光度法與熒光光度法的區(qū)別

2022.10.20

一、指代不同

1、可見分光光度法:通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,對該物質(zhì)進行定性和定量分析的方法。

2、熒光光度法:根據(jù)物質(zhì)的熒光譜線位置及其強度進行物質(zhì)鑒定和含量測定的方法。

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二、特性不同

1、可見分光光度法:具有靈敏度高、操作簡便、快速等優(yōu)點,是生物化學實驗中最常用的實驗方法。許多物質(zhì)的測定都采用分光光度法。在分光光度計中,將不同波長的光連續(xù)地照射到一定濃度的樣品溶液時,便可得到與不同波長相對應的吸收強度。

2、熒光光度法:由于不同的物質(zhì)其組成與結(jié)構(gòu)不同,所吸收的紫外-可見光波長和發(fā)射光的波長也不同,同一種物質(zhì)應具有相同的激發(fā)光譜和熒光光譜,將未知物的激發(fā)光譜和熒光光譜圖的形狀、位置與標準物質(zhì)的光譜圖進行比較,即可對其進行定性分析。

三、作用不同

1、可見分光光度法:在定量分析時,首先需要測定溶液對不同波長光的吸收情況(吸收光譜),從中確定最大吸收波長 ,然后以此波長 的光為光源(單色光),進行吸光度A的測定,是朗伯比爾定律用于定量分析的首要條件。

2、熒光光度法:測量物質(zhì)的熒光強度可對其進行定量測定。熒光分析法的特點是靈敏度高、選擇性好、樣品用量少和操作簡便。


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