lowry法測蛋白質原理
lowry法測蛋白質原理如下:
實驗原理:磷鉬酸和磷鎢酸在堿性條件下易被酚類化合物還原而呈藍色反應。因蛋白質中含有代酚基的酪氨酸,故有此反應。
Lowry法最早是由Lowry確定蛋白質濃度測定的基本步驟,以往在生物化學領域中廣泛應用。Lowry法的顯色原理是根據雙縮脲反應,蛋白質中的肽鍵在堿性條件下與Cu2+反應,生成紫紅色Cu+復合物。
Folin酚試劑在Cu+的催化下,磷鉬酸-磷鎢酸鹽被蛋白質中的芳香族氨基酸殘基還原,產生深藍色的鉬藍和鎢藍混合物,其最大吸收峰在745~750nm處。在一定的濃度范圍內,所形成藍色的深淺與蛋白質含量之間有線性關系,可用于蛋白質含量的測定。
在蛋白質混合物經過粗分離、純化后,可以得到目的蛋白。蛋白分離公司提供的蛋白的粗分離服務首先是使用蛋白質提取緩沖液提實驗材料,由于蛋白提取中目標蛋白質的濃度往往較低,需要采取一些簡單的方法使目標蛋白濃縮,同時去除大量的雜質。
然后根據蛋白質分子大小、分子性狀、分子表面特征或分子帶電狀況進行進一步純化,也就是蛋白質的細分級。在蛋白分離純化后,使用Lowry法測重組蛋白的含量。美迪西提供蛋白分離服務,可以根據客戶要求,承接從mg到kg級的化合物純化分離服務。
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