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DIA無(wú)需指定目標(biāo)肽段,掃描點(diǎn)數(shù)均勻,利用譜圖庫(kù)即可實(shí)現(xiàn)定性確證和定量離子篩選,并可實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)回溯。
PRM(平行反應(yīng)監(jiān)視,parallel reaction monitoring)是一種基于高分辨、高精度質(zhì)譜的靶向蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),能夠?qū)δ繕?biāo)蛋白質(zhì)、目標(biāo)肽段(如發(fā)生翻譯后修飾的肽段)進(jìn)行選擇性檢測(cè),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)蛋白質(zhì)/肽段進(jìn)行絕對(duì)定量。
上海中科新生命擁有超過(guò)10年的質(zhì)譜方法開(kāi)發(fā)經(jīng)驗(yàn),已經(jīng)建立了多種代謝物、蛋白質(zhì)的特異性分析方法,通過(guò)基于三重四級(jí)桿質(zhì)譜平臺(tái)(經(jīng)CFDA批準(zhǔn)用于體外診斷(IVD)),我們?yōu)橘|(zhì)譜的臨床檢測(cè)應(yīng)用服務(wù)提供支持。
基于LC-MS/MS分析能夠精確測(cè)定蛋白質(zhì)或多肽分子質(zhì)量這一特性,從而檢測(cè)蛋白質(zhì)或者多肽上位點(diǎn)發(fā)生何種修飾??蓹z測(cè)修飾類型如下: 磷酸化、糖基化、乙?;?、泛素化、丙?;⒍□;?、丙二酰化、戊二?;?、琥珀?;?、單甲基化、二甲基化、三甲基化
采用CST優(yōu)質(zhì)抗體,特異性高; 鑒定通量高, 一次最高檢測(cè)超過(guò)25000個(gè)磷酸化修飾位點(diǎn); 上萬(wàn)篇文獻(xiàn)見(jiàn)證。
4D-label free磷酸化蛋白組學(xué)是基于timsTOF Pro質(zhì)譜儀,通過(guò)數(shù)據(jù)依賴性采集-同步累積連續(xù)碎裂(ddaPASEF)掃描模式進(jìn)行差異磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)分析。4D-label free修飾
4D-label free泛素化蛋白組學(xué)是基于timsTOF Pro質(zhì)譜儀,通過(guò)數(shù)據(jù)依賴性采集-同步累積連續(xù)碎裂(ddaPASEF)掃描模式進(jìn)行泛素化差異蛋白質(zhì)組學(xué)分析。 封面圖
利用針對(duì)不同甲基化位點(diǎn)和修飾形式的基序抗體對(duì)甲基化肽段富集后,再用LC-MS/MS分析,實(shí)現(xiàn)大規(guī)模甲基化蛋白質(zhì)定性定量分析。
糖基化是指蛋白質(zhì)在酶的作用下將糖鏈連接到蛋白質(zhì)特定氨基酸形成糖苷鍵的過(guò)程。細(xì)胞內(nèi)超過(guò) 50% 的蛋白質(zhì)都有一個(gè)或多個(gè)糖鏈。連接于天冬酰胺(Asn)殘基上的N-糖基化在真核生物中廣為存在,也是研究最為深入的一種糖基化形式。蛋白質(zhì)N-糖基化修飾主要在復(fù)雜的多細(xì)胞或組織形成過(guò)程中起關(guān)鍵作用,參與細(xì)胞識(shí)別、免疫應(yīng)答、細(xì)胞分化等生命活動(dòng)。 蛋白質(zhì)經(jīng)酶解后利用凝集素(lectin)富集N-糖基化肽段,再用N-糖酰胺酶(PNGase)在重水中切除糖鏈,然后通過(guò)LC-MS/MS對(duì)糖基化位點(diǎn)進(jìn)行分析,實(shí)現(xiàn)大規(guī)模N-糖基化蛋白質(zhì)定性定量分析。
利用LC-ESI-MS/MS蛋白鑒定技術(shù)對(duì)IP、co-IP、pull-down等純化溶液樣本進(jìn)行蛋白鑒定,得到與目標(biāo)蛋白相互作用的一系列蛋白質(zhì)。
蛋白質(zhì)全譜分析也可稱為質(zhì)譜shotgun分析,指的是組分分析,研究對(duì)象是完整的組織、體液或其提取物,其目的在于鑒定出盡可能多的肽和蛋白質(zhì)分子。
對(duì)蛋白質(zhì)樣本進(jìn)行酶解,通過(guò)LC-MS/MS分析肽段樣本,使用Biopharma Finder軟件分析,獲得翻譯后修飾數(shù)據(jù),給出相關(guān)修飾位點(diǎn)及含量信息。
Label-free(蛋白質(zhì)非標(biāo)記定量技術(shù))是通過(guò)LC-MS/MS技術(shù)對(duì)蛋白質(zhì)酶解肽段進(jìn)行質(zhì)譜分析,無(wú)需使用穩(wěn)定同位素標(biāo)簽,只需分析大規(guī)模鑒定蛋白質(zhì)時(shí)所產(chǎn)生的質(zhì)譜數(shù)據(jù),比較不同樣品中相應(yīng)肽段的信號(hào)強(qiáng)度,從而對(duì)肽段對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì)進(jìn)行相對(duì)定量。
1) 測(cè)定大分子蛋白質(zhì)樣品(比如抗體類藥物)分子量; 2) 得到蛋白質(zhì)樣品(約10-150KDa)的精確分子量; 3) 分析蛋白質(zhì)的修飾狀態(tài)(比如糖基化、磷酸化、氧化、C末端K缺失情況等),并進(jìn)行定量分析。
4D-label free乙?;揎椀鞍捉M學(xué)是基于timsTOF Pro質(zhì)譜儀,通過(guò)數(shù)據(jù)依賴性采集-同步累積連續(xù)碎裂(ddaPASEF)掃描模式進(jìn)行乙?;町惖鞍踪|(zhì)組學(xué)分析。
利用LC-MS/MS蛋白鑒定技術(shù)對(duì)膠點(diǎn)樣本(2D膠挖點(diǎn))、膠條樣本(即SDS-PAGE樣本)進(jìn)行蛋白鑒定。
電荷異質(zhì)性對(duì)單抗穩(wěn)定性及其生物學(xué)功能發(fā)揮具有重要影響而成為關(guān)鍵質(zhì)量屬性(CQA),并且電荷異質(zhì)性可反映其工藝穩(wěn)定性,用于質(zhì)量控制中類似藥和原研藥以及批次間一致性的比較。
測(cè)定蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、糖蛋白等化合物的相對(duì)分子質(zhì)量。分子量是有機(jī)化合物最基本的理化性質(zhì)參數(shù),也是產(chǎn)品報(bào)批的重要數(shù)據(jù)之一。分子量正確與否往往代表著所測(cè)定的有機(jī)化合物及生物大分子的結(jié)構(gòu)正確與否。
應(yīng)用 · 工藝優(yōu)化:一級(jí)結(jié)構(gòu)鑒定/修飾位點(diǎn)分析 · 生物類似藥:和原始抗體的序列和修飾比較
應(yīng)用 · 工藝優(yōu)化:一級(jí)結(jié)構(gòu)鑒定/修飾位點(diǎn)分析 · 生物類似藥:和原始抗體的序列和修飾比較
應(yīng)用 · 多肽全序列測(cè)序 · 非標(biāo)準(zhǔn)氨基酸的序列檢測(cè)