“膠”你做實驗—鎂伽基質膠Extragel上線!
基質膠指一種從小鼠腫瘤中提取出的基底膜基質,主要包含層粘連蛋白、IV型膠原蛋白、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖等[1],是用于體外模擬細胞真實生長環境的重要生物試劑。
鎂伽生物基質膠(Extragel)來源于富含胞外基質蛋白的小鼠腫瘤組織,除上述主要成分外,同時還包含多種生長因子[2],例如表皮生長因子EFG、血小板衍生生長因子PDGF、神經生長因子NGF、堿性成纖維細胞生長因子FGF-2、乙型轉化生長因子TGF-beta和胰島素樣生長因子ILGF等。
基底膜(Basement membrane)結構示意圖[3]
01
產品特點
自主研發與應用開發
基質膠(Extragel)由鎂伽生物自主研發,并應用于類器官3D培養研究中;
嚴格質檢
無乳糖脫氫酶升高病毒(LDEV)污染,且細菌、真菌和支原體檢測均為陰性;
供應鏈保障
單批產量在40L級別以上,且批間性能穩定,保障可靠供應;
低內毒素
內毒素含量≤4 EU/mL,細胞毒性小。
? ? ? ? ? ? Extragel
02
應用介紹
室溫條件下,鎂伽生物基質膠(Extragel)能聚合形成具有生物學活性的三維基質,模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能,為體外培養提供營養環境和3D支架,有利于體外細胞的培養和分化。
同時,鎂伽科學家們通過大量的實驗驗證保障產品的穩定性和實用性,多種應用實驗數據均表明該產品的重復性良好且實驗結果更佳,豐富的產品種類也為科研人員提供了更多選擇。
鎂伽生物基質膠(Extragel)可廣泛應用于3D培養實驗,包括細胞生長和分化、代謝/毒理學研究、侵襲實驗、血管生成實驗及類器官構建研究和小鼠成瘤實驗等多種應用場景。
03
應用案例分享
01?細胞侵襲實驗
除去transwell膜表面的細胞后,收集用乙酸洗脫下的與結晶紫結合的細胞,并檢測洗脫液在590nm處的吸光度。結果表明,基質膠(Extragel)能在細胞侵襲實驗中充分發揮屏障作用。
· HT-080細胞的細胞侵襲實驗結果圖
02?成血管實驗
通過Calcium AM活細胞染色,可觀察到細胞在基質膠(Extragel)和國外A公司的基質膠產品中均具有良好的成管能力。
· 人臍靜脈內皮細胞HUVEC在基質膠上的成管圖
03?類器官生長實驗
通過對比類器官平均大小的參數,結果表明鎂伽的類器官專用基質膠比國外A公司的產品能更好的支持類器官生長。
· hESC來源的膽管類器官
在ExtragelOrg類器官專用基質膠的生長情況
04?人膽管類器官實驗
通過對人膽管類器官培養,并對其進行熒光染色和3D重建,結果表明基質膠(Extragel)能夠支持膽管類器官的生長,并且保持其特異的生物標志物的表達。
· 人膽管類器官在基質膠(Extragel)中生長情況
*細胞成像由細胞核抗體DAPI(藍色),緊密連接蛋白抗體anti-ZO-1(綠色)和細胞骨架蛋白抗體F-actin (紅色)染色而成。
05?肝癌類器官實驗
通過對肝癌類器官培養,并對其進行熒光染色和3D重建。結果表明,肝癌類器官鎂伽基質膠(Extragel)可以支持肝癌類器官的生長,并且保持其特異的生物標志物的表達。
· 肝癌類器官在基質膠(Extragel)中的生長情況
*細胞成像由細胞核染料DAPI(藍色),肝臟細胞生物標志物HNF4a(綠色)和肝癌標志物GPC3(紅色)的抗體染色而成。
06?腸癌類器官實驗
通過對人結腸癌類器官培養,并在培養第7天對其進行熒光染色成像。結果表明,鎂伽基質膠可以很好地保持腫瘤標志物的表達。
· 人結直腸癌組織來源的腸癌類器官
在ExtragelOrg類器官專用基質膠中的生長情況
* 細胞成像由腫瘤標志物Ki67(綠色)、甲胎蛋白AFP的抗體(紅色)、細胞骨架蛋白F-actin的染料(青色)和細胞核染料DAPI(藍色)染色而成。
07?癌旁組織
通過癌旁組織來源的腸類器官培養,并在培養第7天對其進行熒光染色成像。結果表明,鎂伽基質膠可以很好地保持腸標志物的表達。
· 癌旁組織來源的腸類器官在基質膠中的生長情況
* 細胞成像由緊密連接蛋白ZO-1(綠色)、上皮細胞標志物CK19(紅色)、細胞骨架蛋白F-actin的染料(青色)和細胞核染料DAPI(藍色)染色而成。
08?支持神經干細胞相關實驗
大鼠神經干細胞在基質膠(Extragel)中培養7天后在顯微鏡下成像,并進行熒光染色分析。此實驗常應用于神經毒性和神經元分化發育評估。
· 大鼠神經干細胞在基質膠中進行生長分化,
并形成神經突網絡
* 細胞成像由神經細胞標志物Tuj1的抗體(紅色)和細胞核染料DAPI(藍色)染色而成。右圖為加了偽彩的神經元照片。
《基質膠 | Extragel-用于3D培養和類器官構建》
內含基質膠產品清單列表
參考文獻:
[1].Kleinman HK, et al, Basement membrane complexes with biological activity. Biochemis-try 25: 312 (1986).
[2].Vukicevic, Slobodan, et al. ldentification of multiple active growth factors in basementmembrane Matrigel suggests caution in interpretation of cellular activity related to extra-cellular matrix components. Experimental cell research 202: 1 (1992).
[3].David G. Menter,et al, Prostaglandins in Cancer Cell Adhesion, Migration, and Invasion International Journal of Cell Biology10 : 1155 (2012).
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