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測定飼料中單寧的方案(分光光度法)

美析儀器
2022.9.08

測定飼料中單寧的方案

01引言

目前,“飼料禁抗”已成為全球畜牧業生產的趨勢,對提高畜產品質量安全、增加綠色優質畜產品供給、降低養殖生產成本、促進畜產品出口、實現畜牧業可持續發展意義深遠。單寧作為替抗產品在動物生產中的應用具有一定的可行性。

關鍵詞單寧??分光??美析

02原理

用丙酮溶液提取飼料中單寧類化合物,經過濾后,取濾液加鎢酸鈉-磷鉬酸混合溶液和碳酸鈉溶液,顯色后,以試劑為空白對照,用分光光度計于760 nm波長處測定吸光度值,用單寧酸作標準曲線測定飼料中單寧含量。

03

儀器與試劑

美析UV-1500紫外可見分光光度計:帶10 mm比色皿,可在760 nm處測定。

電子天平:感量為0.1mg.

粉碎機。

振蕩儀。

單標線吸管:1 mL,10 mL,50 mL,A級。刻度吸管:5mL。

容量瓶:50 mL,100 mL,200 mL,A級。具塞三角瓶:250 mL。

中速定量濾紙。

除非另有說明,本標準中所用試劑均為分析純,水符合GB/T 6682三級用水規定。

鎢酸鈉(Na2O4W·2H2O).

磷鉬酸(H2Mo12O40P·XH2O)。

鎢酸鈉-磷鉬酸混合溶液:稱取100.0g鎢酸鈉、20.0g磷鉬酸,溶于約750 mL水中,移入1000 mL回流瓶中,加入50 mL磷酸,充分混勻,接上冷凝管,在沸水浴上加熱回流2h,冷卻,轉入1000 mL容量瓶中,用水定容至刻度﹐搖勻,過濾﹐置棕色瓶中保存。室溫下可保存14 d。

無水碳酸鈉(Na2CO3)。

碳酸鈉溶液(75 g/L):稱取37.5 g無水碳酸鈉,溶于250 mL溫水中,混勻,冷卻,稀釋至500 mL,過濾到儲液瓶中備用。室溫下可保存7d.

丙酮(C3H6O)。

丙酮溶液(1+1,體積比):分取等體積的水和丙酮(4.6),等體積混合,搖勻,即得。

單寧酸標準品(C76H52O46):含量≥95.0%。

單寧酸標準儲備液:稱取單寧酸標準品適量(精確到0.0001g),加適量水溶解,用水定容至100 mL,搖勻,制成單寧酸質量濃度約為1 mg/mL的標準儲備液。在冰箱中4℃可保存5d。

單寧酸標準使用液;精密量取單寧酸標準儲備液10.00 mL,置200 mL容量瓶中,用水定容至200 mL,搖勻。此溶液單寧酸質量濃度為50 mg/L,用時現配。

試樣制備

按GB/T 14699.1采樣,按GB/T 20195制備試樣,磨碎,通過0.45 mm孔篩,混勻,裝入密閉容器中,避光低溫保存備用。

04

分析步驟

試液的制備

稱取試樣1 g~2 g(精確至0.000 1 g),置于250 mL具塞三角瓶中,精密加入丙酮溶液50.00 mL,加塞密封,置振蕩儀上振搖40 min,靜置,用中速定量濾紙過濾,棄去初濾液,續濾液供測定用。

測定

標準曲線的繪制

精密量取單寧酸標準使用液0.00 mL,0.50 mL,1.00 mL,2.00 mL,3.00 mL,4.00 mL、5.00 mL和6.00 mL,分別置盛有約30 mL水的50 mL容量瓶中,搖勻;加鎢酸鈉-磷鉬酸混合溶液2.5 mL,加碳酸鈉溶液5.0 mL,搖勻;分別用水定容至50 mL,播勻。單寧酸標準溶液濃度分別為0.00 mg/L,0.50 mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L,3.00 mg/L、4.00 mg/L,5.00 mg/L和6.00 mg/L,放置30 min顯色后,以標準曲線0.00 mg/L為空白,在760 nm波長處測定標準溶液的吸光度,以單寧酸濃度為橫坐標,吸光度值為縱坐標,繪制標準曲線。

試樣的測定

精密量取試液1.00 mL,置盛有約30 mL水的50 mL容量瓶中,搖勻;加鎢酸鈉-磷鉬酸混合溶液2.5 mL,加碳酸鈉溶液5.0 mL,搖勻;用水定容至50 mL,搖勻。放置30 min顯色后,以標準曲線0.00 mg/L為空白,在760 nm波長處測定試樣溶液的吸光度,根據標準曲線求出試液中單寧酸的濃度。如果吸光度值超過6.00 mg/L單寧酸的吸光度時,將試液稀釋后重新測定。

05

計算結果

試樣中單寧(以單寧酸計)的含量X,以質量分數表示,單位為毫克每千克(mg/kg),按式計算。

式中:

c——試樣測定液中單寧酸的濃度,單位為毫克每升(mg/L);

v——試樣定容體積,單位毫升(mL);

D——試樣稀釋倍數;

m——試樣質量,單位為克(g)。

06

儀器參數

UV-1500PC紫外可見分光光度計

儀器特點

*采用單片微機控制,128*64位液晶顯示

*寬大的液晶顯示器可顯示多組數據

*巨大的內存空間,可存儲多組數據和曲線

*自動調0、調100%功能

*波長自動調節

*光源自動切換,濾色片自動切換

*寬大樣品池(5mm~100mm)

*具有最多十點標樣建標準曲線測量功能

*可通過直接輸入K、B因子建立標準曲線進行定量測量

*可直接輸入標樣和對應濃度值建立標準曲線進行定量測量

*可斷電保存測量設置的標準曲線參數

*配備通用并行打印接口,可打印標題欄、測量數據、曲線參數、曲線標準樣品點和曲線

*配USB接口

*可通過PC軟件控制實現光譜掃描等更精確和靈活的測量要求

技術指標及基本參數

*波長范圍:190~1100nm

*光譜帶寬:2nm

*波長準確度:±0.5nm

*波長重現性:≤0.2nm

*透射比準確度: ±0.3% τ

*透射比重復性:0.15% τ

*雜散光:≤0.05% τ (220nm NaI,340nm NaNO2)

*穩定性:0.001A/h(500nm預熱后)

*測光方式:透過率、吸光度、濃度、能量

*波長調節:自動調節

*光度范圍:-0.3~3A

*顯示方式:128*64液晶

*檢測器:進口硅光二極管

*光源:進口氘燈,進口鎢燈

*電源:AC 220V/50Hz或110V/60Hz

*功率:120W

*儀器尺寸:480×350×220mm

*主機凈重:15Kg

07關

于美析

上海美析儀器有限公司(以下簡稱美析),是一家具有自主知識產權的高新技術企業,美析的創業理念“科技——因你改變”,并以此為企業宗旨,不斷探究、果敢創新。特別是在分析測試儀器領域,不斷開發出先進的產品,使美析成為優質儀器資源的供應者。

美析主營光譜類儀器:可見分光光度計、紫外可見分光光度計、原子吸收光譜儀、原子熒光光度計、ICP-AES、ICP-MS,生命科學儀器:超微量分光光度計、全自動核酸提取儀,目前,我們的產品已廣泛應用于有機化學、無機化學、生物化學、醫藥、環保、冶金、石油、農業等領域。同時美析利用在產品機械結構、光學設計、電氣應用和軟件開發方面積累的豐富經驗,結合市場的最新實際需求,近期將陸續推出一批全新的分析類儀器。

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