使用說明（操作前必讀）

1、硬件操作

熒光分光光度計在使用時，需要注意開機次序，以保護設(shè)備之間不受影響。熒光光譜儀開機順序一般為先開氙燈，然后開儀器主機，Z后開跟儀器連接的計算機。如此操作的原因在于穩(wěn)態(tài)氙燈是高壓點亮，為了避免瞬問脈沖電流對周圍設(shè)備造成影響，需要先開氙燈，等電流穩(wěn)定后再打開周邊的電腦等設(shè)備。關(guān)機順序則相反。

2、軟件操作

熒光定量分析多采用工作曲線法，即以已知量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，按試樣相同方法處理后，配成一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，測定其相對熒光強度和空白溶液的相對熒光強度；扣除空白值后，以熒光強度為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制工作曲線；然后將處理后的試樣配成一定濃度的溶液，在同一條件下測定其相對熒光強度，扣除空白值后，從工作曲線上求出熒光物質(zhì)的含量。

在用熒光分析法測定某些會引起熒光改變的微量物質(zhì)時，常采用差示熒光法，可使熒光強度的讀數(shù)差距拉大，使熒光強度的降低加大，從而提高方法的靈敏度和準(zhǔn)確度。

熒光分光光度計操作步驟

1、開機

（1）開啟計算機

（2）開啟儀器主機電源按下儀器主機左側(cè)面板下方的黑色按鈕（POWER）同時，觀察主機正面面板右側(cè)的Xe LAMP 和RUN指示燈依次亮起來，都顯示綠色為正常。

（3）雙擊桌面圖標(biāo)（FL SoluTIons 4.1 for F-7000），主機自行初始化，掃描界面自動進入

（4）初始化結(jié)束后，須預(yù)熱15-20分鐘，出現(xiàn)操作主界面（界面右下角出現(xiàn)Ready）

2、點擊掃描界面右側(cè)“Method”

在“General”選項中的“Measurement”選擇“wavelength scan”測量模式 在“Instrument”選項中設(shè)置儀器參數(shù)和掃描參數(shù) 選擇掃描模式“Scan Mode”：Emission/ExcitaTIon（發(fā)射光譜/激發(fā)光譜） 選擇數(shù)據(jù)模式“Data Mode”：Fluorescence （熒光測量） 設(shè)定波長掃描范圍

掃描熒光激發(fā)光譜（ExcitaTIon）：需設(shè)定激發(fā)光的起始/終止波長（EX Start/End WL）和熒光發(fā)射波長（EM WL）

掃描熒光發(fā)射光譜（Emission）：需設(shè)定發(fā)射光的起始/終止波長（EM Start/End WL）和熒光激發(fā)波長（EX WL）

其他選項可選擇默認(rèn)值（也可根據(jù)具體實驗要求自行設(shè)定） 參數(shù)設(shè)置好后，點擊“確定”

3、設(shè)置文件存儲路徑（此步也可不進行參數(shù)設(shè)置，可以在按5中方法進行保存）

（1）點擊掃描界面右側(cè)“Sample”

（2）樣品名可自行命名

（3）選中“Auto File”，可以自動保存原始文件和TXT格式文本文檔數(shù)據(jù)

（4）參數(shù)設(shè)置好后，點擊“OK”

4、掃描測試

（1）打開蓋子，放入待測樣品后，蓋上蓋子（請勿用力）

（2）點擊掃描界面右側(cè)“Measure”，窗口在線出現(xiàn)掃描譜圖

5、數(shù)據(jù)處理與保存

（1）選中自動彈出的數(shù)據(jù)窗口

（2）右鍵--“Trace”，進行讀數(shù)并尋峰等操作

（3）“File”--“Save as”對數(shù)據(jù)進行保存

6、關(guān)機順序：

（1）關(guān)閉運行軟件FL SoluTIon 2.1 for F-7000

（2）選中“Close the lamp，then close the monitor windows？”點擊“Yes”窗口自動關(guān)閉同時，觀察主機正面面板右側(cè)的Xe LAMP指示燈暗下來，而RUN指示燈仍顯示綠色

（3）約十分鐘后，關(guān)閉儀器主機電源，即按下儀器主機左側(cè)面板下方的黑色按鈕（POWER）（目的是僅讓風(fēng)扇工作，使Xe燈室散熱）

（4）從樣品池中取出所有比色皿，清洗干凈以便下一次使用

（5）關(guān)閉計算機

熒光分光光度計使用注意事項

1、在實驗開始前，應(yīng)提前打開儀器預(yù)熱，并配制好所需的溶液，對于已經(jīng)配制好的溶液，在不用時放在4℃冰箱中保存，放置時間超過一星期的溶液要重新配制。

2、在測試樣品時，注意熒光強度范圍的設(shè)定不要太高，以免測得的熒光強度超過儀器的測定上限。

3、實驗所用的樣品池是四面透光的石英池，拿取的時候用手指掐住池體的上角部，不能接觸到四個面，清洗樣品池后應(yīng)用擦鏡紙對其四個面進行輕輕擦拭。

4、實驗結(jié)束后，要及時的清理臺面，處理廢液，清洗和放置好樣品池，將下次要用的溶液放回冰箱，并且按規(guī)定登記實驗記錄，養(yǎng)成良好的實驗習(xí)慣。